反相色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，因此有较高的碳含量和更好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力，适用范围较广，是高效液相色谱仪分析中首要选择的色谱柱类型。
目前，反相色谱柱适用范围广，从极性化合物到非极性化合物都可获得良好的分离，在碳水化合物如低聚糖、苷类糖化学，生药学和天然产物化学，生物物质如多肽、蛋白、核酸等多个领域发挥重要作用。
反相色谱柱的结构及主要功能：
本产品是由柱管、接头、封头、密封环、压帽、筛板、柱填料等组成。
1、柱管：多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。
2、接头：柱两端连接流动相与柱管的中空环套，由不锈钢制成。用于柱管路联通与柱端高压固定。
3、封头：柱两端的密封螺丝，用于保存色谱柱时封头。
4、密封环：位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，用于反相色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。
5、压帽：即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。
6、筛板：位于反相色谱柱两端紧贴柱管端的筛网状薄片，由烧结不锈钢或钛合金制成，孔径取决于填料粒度，一般为0.2~20&um(5~10&um)。用于防止填料从柱管内漏出。
7、柱填料：装填于柱管内的固定相担体，其直接决定了反相色谱柱的类型与用途，是色谱柱的核心。多为无定形或球形硅胶基质，也有环糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化铝等基质。用于色谱分离。
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