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色谱柱内径对小分子药物灵敏度的影响
色谱柱内径对小分子药物灵敏度的影响
更新时间:2023-02-13 点击次数:876
在实际工作中,色谱工作者们通常需要更高的灵敏度。而这一要求可以通过简单的改变色谱柱内径来达到。当样品浓度以及进样体积相同时,通过减小色谱柱内径,可以提高紫外检测器的响应。以下应用显示了色谱柱内径对灵敏度的影响,将色谱柱内径从4.6mm减小到1.5mm,显著提高了灵敏度。
分别使用长度相同而内径不同的4支HALO色谱柱及其流速:
①
HALO 90Å C18, 2.7 µm,
1.5 x100 mm(流速:0.2 mL/min);
②HALO 90Å C18, 2.7 µm, 2.1 x 100 mm
(流速:
0.4 mL/min
)
;
③HALO 90Å C18, 2.7 µm, 3.0 x 100 mm
(流速:
0.8 mL/min
)
;
④HALO 90Å C18, 2.7 µm, 4.6 x 100 mm
(流速:1.88
mL/min
)
。
色谱条件:流动相A:0.1% DFA;流动相B:0.1% DFA 乙腈,梯度洗脱。柱温:35℃;检测波长:254nm;进样体积:1
µ
L。
如下图所示,出峰顺序依次为:1.阿替洛尔;2.吲哚洛尔;3.普萘洛尔;4.吲哚洛酚;5.萘普生;6.华法林。灵敏度随着色谱柱内径的减小而提高。
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