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在C30色谱柱操作过程中,需要注意下列问题
在C30色谱柱操作过程中,需要注意下列问题
更新时间:2022-11-16 点击次数:826
C30色谱柱
是采用封端的工艺、表面键合C30长链基团,与传统的C18色谱柱相比,C30的疏水性更强,即使使用纯有机相,很多样品都可以保留。C30有较好的亲脂性和疏水性,适用于分离胡萝卜素异构体、脂溶性维生素等。C30在高水含量流动相条件下也能对亲水性样品有很好的分离效果。
产品特点:
1、C30长链有较好的亲脂性和疏水作用力
2、也可用于分离维他命E等脂溶性物质
3、推荐的pH应用范围2.0-6.0
C30色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护C30色谱柱。
1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使C30色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
2、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
3、一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
5、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和C30色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
6、经常用强溶剂冲洗C30色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
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